大肠杆菌OH7在不锈钢表面生物膜形

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生物膜是指微生物为了适应环境,黏附于非生物或活性组织表面,分泌大量的多糖、蛋白质和核酸等不均一的胞外基质,将菌体自身包裹在其中而形成的大量菌体聚集膜状物,是菌体在自然界中常见的生存状态,直接影响着人类生产和生活的各个方面。大肠杆菌O:H7常通过形成生物膜附着在食品、食品加工设备、包装材料等表面,难以杀灭与清除,从而形成持续性的污染,产生食品安全隐患,造成巨大的经济损失,并且增加了食源性疾病爆发的风险。

在接触面上生物膜的形成是一个复杂的动态过程,受到很多因素的影响。与在实验室条件下评估的生物膜相比,真实的食品加工环境中的生物膜可能出现不同的生长情况。目前,国内鲜有针对肉牛加工环境条件下牛肉源大肠杆菌O:H7生物膜形成的报道,尤其是针对有肉汁残留的不锈钢表面。因此,牛肉汁培养基(BE)和实验室标准培养基对不同大肠杆菌O:H7生物膜形成的影响是否存在差异尚不清楚。山东农业大学食品科学与工程学院的吴丽娜、董鹏程和朱立贤*等人用BE为生长基质用于模拟真实的食品加工环境,并以实验室标准培养TSB为对照,以不锈钢为接触面,研究牛肉源不同大肠杆菌O:H7菌株生物膜的形成能力及其菌株特性,为大肠杆菌O:H7的控制提供指导,从而有助于开发有效的生物膜防控技术。

1生物膜形成能力

BE培养基用于模拟肉类加工环境,以获得与实际加工情况最接近的实验数据。研究发现,本实验使用的所有大肠杆菌O:H7在2种培养基中都可以附着在不锈钢表面上,菌株、时间、培养基质的交互作用对生物膜的形成有显著影响(P<0.05)。

3株菌都在初始1h内没有产生黏附。所测试的菌株之间的生物膜数量差异显著(P<0.05),其中,菌株的最大黏附量要高于S1菌株和菌株的最大黏附量。3株菌在不锈钢上的最大黏附数量为4.65(lg(CFU/cm2)),黏附数较低,这可能与接触面的材质有关,表面疏水特性的菌株倾向于黏附在疏水材料表面,表面亲水特性的菌株倾向于黏附在亲水材料表面,表面疏水菌株比亲水细菌更易在接触表面附着,不锈钢片属于亲水材料,细菌在不锈钢上的黏附能力较差。

3株菌在不锈钢表面产生最大黏附的时间不一致,S1菌株在第7天产生最大黏附,菌株在第5天形成最大黏附,而菌株在TSB中生长较快,在第1天形成最大黏附,在BE中生长较慢,在第7天形成最大黏附。

不同的菌株在不锈钢片上的生长趋势不一致,除了所用菌株本身原因之外,还可能是因为培养基质的不同。生物膜形成受到所用培养基类型的影响,对于3株菌的最大生物膜形成能力来说,在TSB中培养的S1、两株菌显示出比BE中更高的生物膜形成能力,而菌株刚好相反。

2菌株特性

在本研究中,在不同菌株中观察到自聚能力的变化(图1A)。3株菌的自聚能力不同,其中菌株的自聚能力要显著高于其他2株菌(P<0.05)。由图1B可知,不同菌株的泳动能力有显著差异,S1菌株和菌株的群体泳动能力显著低于(P<0.05),S1和的单一泳动能力低于(P<0.05)。群体泳动能力的结果与大肠杆菌O:H7在不锈钢上初始黏附的结果一致,S1菌株和菌株的初始黏附要低于菌株。如图1C所示,不同菌株疏水性不同。其中,菌株对二甲苯的亲和力要显著高于其他2株菌,表明菌株的疏水性要显著高于其他2株菌(P<0.05)。

3生物膜形成能力与菌株特性的相关性

结果显示,菌株的疏水性与自聚性存在极显著的正相关(P<0.01),单一泳动能力与疏水性存在极显著的正相关(P<0.01),TSB中的生物膜形成能力只和群体泳动存在显著正相关(P<0.05),而BE中的生物膜形成只和疏水性存在极显著正相关(P<0.01)。除此之外,菌株在2种培养基质中的生物膜形成能力不存在相关性。

结论

大肠杆菌O:H7可以在工厂中常用的不锈钢表面形成生物膜。其生物膜形成能力受菌株、培养时间和培养基质显著影响且存在交互作用;各菌株的自聚能力、泳动能力、疏水性等指标呈现出显著差异。其中群体泳动能力、疏水性分别与TSB、BE中生物膜形成能力有显著相关性。需要进一步研究不同大肠杆菌O:H7菌株在不锈钢表面生物膜形成的机制。

本文《大肠杆菌O:H7在不锈钢表面生物膜形成能力及其与菌株的特性关系》来源于《食品科学》年41卷22期-页,作者:吴丽娜,董鹏程,张一敏,毛衍伟,梁荣蓉,杨啸吟,朱立贤,罗欣。DOI:10./spkx---。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。

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